生物樣本大都對(duì)溫度極其敏感,尤其是細(xì)胞樣本、制品。隨著細(xì)胞治療的快速發(fā)展,細(xì)胞冷凍技術(shù)及效果變得更加重要?,F(xiàn)在也有一些冷凍降溫是通過高溶度的凍存保護(hù)劑保障活率,大劑量的凍存保護(hù)劑往往對(duì)細(xì)胞、回輸受體有害,如何安全有效的提高細(xì)胞及制劑的冷凍效果,是一個(gè)重要課題。
程序降溫儀是一種高性能,安全可靠的溫變速率可調(diào)的冷凍系統(tǒng),現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于輕工、農(nóng)、醫(yī)、基礎(chǔ)生物研究等各個(gè)領(lǐng)域中,用于組織庫(kù)、骨髓細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞,動(dòng)、植物細(xì)胞、心肌細(xì)胞等的凍存。
程序降溫儀基于控制系統(tǒng)原理,通過傳感器檢測(cè)環(huán)境溫度,并將其與設(shè)定的目標(biāo)溫度進(jìn)行比較。根據(jù)差異,控制系統(tǒng)將啟動(dòng)相應(yīng)的冷卻或加熱裝置來(lái)調(diào)整環(huán)境溫度,以使其逐漸接近或保持在目標(biāo)溫度范圍內(nèi)。
使用步驟:
1、冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基,使細(xì)胞處于指數(shù)生長(zhǎng)期。
2、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜(DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞,取少量細(xì)胞懸浮液(約0.1ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。
4、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液,并晃動(dòng)試管,制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細(xì)胞濃度為1~5×106cells/ml,混合均勻,分裝于已標(biāo)示*之冷凍保存管中,1~2ml/vial,并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。嚴(yán)密封口后,注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。
應(yīng)用領(lǐng)域:
1、轉(zhuǎn)基因胚胎研究;
2、干細(xì)胞研究;
3、臨床和研究樣本,例如常規(guī)冷凍管中的淋巴細(xì)胞和組織細(xì)胞;
4、各種哺乳動(dòng)物細(xì)胞,包括心肌細(xì)胞,脂肪,肝和肌肉;
5、臍帶血干細(xì)胞;
6、微孔板中的貼壁細(xì)胞和干細(xì)胞;
7、細(xì)胞懸浮液按編號(hào)/條形碼分類和儲(chǔ)存;
8、機(jī)器人集成-CRF-1也已成功集成到機(jī)器人系統(tǒng)中;
9、人的和獸醫(yī)的IVF(試管受精)。